蛋白酶K是一種從白色念珠菌分離出來的強(qiáng)力蛋白溶解酶，具有很高的比活性，是DNA提取的關(guān)鍵試劑。該酶在較廣的pH范圍（4?12.5）內(nèi)及高溫 (50?70°C)均有活性，用于質(zhì)粒或基因組 DNA、RNA的分離。在DNA提取中，主要作用是酶解與核酸結(jié)合的組蛋白，使 DNA游離在溶液中，隨后用不同方法進(jìn)行抽提，除去雜質(zhì)，收集DNA。EDTA等螯合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活。蛋白酶K貯存液一般為10mg/ml或20mg/ml。 貯存于-20°C。蛋白酶K在核酸純化、絲綢、醫(yī)藥、食品和釀造等領(lǐng)域都有著重要的應(yīng)用。由于儲(chǔ)存和運(yùn)輸需要低溫，而且反復(fù)凍融對(duì)活性也有影響，因此有必要開發(fā)一種可以長(zhǎng)期穩(wěn)定保存蛋白酶K的方法。
冷凍干燥技術(shù)是把含有水分的物料預(yù)*行降溫，凍結(jié)成固體，在一定的真空條件下使冰升華，以水蒸氣形式除去，通過二次干燥獲得低含水量的固體干燥物。
冷凍干燥是在低溫、真空狀態(tài)下完成對(duì)制品的脫水干燥過程的，相對(duì)于其他干燥方式具有很多優(yōu)點(diǎn)，目前在生物制品、藥品的干燥方法中是主要選擇。主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：樣品預(yù)凍前完成全體系的分裝，保證劑量的精確性；低溫和真空下干燥，保證物質(zhì)本身的理化性質(zhì)和生物特性；固態(tài)的冰晶升華成為水蒸氣后形成的疏松多孔結(jié)構(gòu)，凍干制品具有良好的速溶性、復(fù)水性；脫水*，重量輕，方便儲(chǔ)存和運(yùn)輸，可以常溫運(yùn)輸和儲(chǔ)存。
但是由于凍干過程是一個(gè)復(fù)雜的相變過程，蛋白酶K作為一種蛋白質(zhì)，在冷凍干燥過程中極易受到凍干過程的低溫效應(yīng)、凍結(jié)效應(yīng)和脫水效應(yīng)的影響，最終導(dǎo)致其酶活性的降低甚至失活。因此為了減少蛋白酶K酶活性在凍干過程中的損傷，篩選合適的凍干保護(hù)劑和合適的凍干工藝尤為重要。
蛋白酶K常用保護(hù)劑蔗糖、海藻糖、甘露醇、右旋糖苷、肌醇、甘氨酸、L絲氨酸、α丙氨酸、PEG、BSA、EDTA、ca離子等。各種保護(hù)劑可以相互組合或者采用單一組分加合適的緩沖液等。不同的保護(hù)劑配方行成的固形物含量不一樣，所以關(guān)鍵溫度不同，采用的凍干工藝技術(shù)路線也不一樣。凍干工藝可以采用一步升華干燥法，或者階梯升溫干燥法，具體的工藝需要根據(jù)溶液的實(shí)際情況進(jìn)行摸索。我公司供應(yīng)凍干機(jī)可以摸索凍干工藝，助力篩選凍干配方，夠買凍干機(jī)提供技術(shù)解決方案和技術(shù)協(xié)助，助力項(xiàng)目開發(fā)。
